微生物限度检查法ppt下载

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微生物限度检查法(2) 控制菌检查方法的验证 控制菌检查方法的验证 确认所采用的方法适合于该药品的控制菌检查 若药品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果时，检查方法应重新验证 验证时，依各品种项下微生物限度标准中规定检查的控制菌选择相应验证的菌株 试验菌液：10-100cfu/ml生理盐水的菌悬液 验证方法及结果判断 试验组: 供试液＋试验菌→ (依相应控制菌检查法检查) 检出试验菌 阴性菌对照组:目的 验证方法的专属性。大肠埃希菌、大肠菌群、沙门菌采用金黄色葡萄球菌；铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、梭菌采用大肠埃希菌→不得检出 若试验组未检出试验菌→应消除抑菌活性 消除抑菌活性的方法应根据供试品性质检验目的，试验菌的性质消除抑菌活性的方法 应根据供试品性质，检验目的， 试验菌的性质及检验条件等通过试验确定及检验条件等通过试验确定 1.培养基稀释法 供试品加稀释剂稀释到一定倍数后进行检验（虽然供试品中污染的菌也稀释，但由于检验结果规定是不得检出，因而有些品种用稀释法可检出目的菌）。 如百喘朋片[1：10 稀释液3ml 结果（＋）试验菌28-96个] 。 本法适用于一般抑菌作用不强的中西药品。  低速离心（500转/分5分钟）取上清液（弃取抑菌成分的固体微粒） 高速离心（3000-3500转/分30分钟）弃去上层抑菌的液体部分，留管底2ml。 本法适用于抑菌作用不强的中西药品，如：平喘胺片 、速效感冒片（先低速，后高速）；小儿惊风散（低速离心）。本法操作较烦琐，药品中污染的微生物有一定的损失。 3.薄膜过滤法 本法适用于有抑菌作用的液体制剂。 如：葡萄糖酸洗必泰含漱剂，氯霉素滴眼 剂等。 注意：供试液应加入较多量的稀释液稀释后，再注入滤器中。 4.中和法 ①磺胺类可加对氨基苯甲酸（100ml增菌培养基中含1%对氨基苯甲酸0.5-1.0ml）如：复方新诺明片 ②含重金属盐类可用含巯基化合物（硫乙醇酸钠，L-胱氨酸）的培养基作增菌培养液。如：磺胺嘧啶银软膏-金黄色葡萄球菌与绿脓杆菌的检验 ③脂溶性药物用表面活性剂中和。如：复方痔疮栓（含洗必泰）中的绿脓杆菌的检验，仅用吐温-80制备供试液即可 5.联合使用 适用于抑菌作用较强的中西药制剂。 如：①复方洗必泰栓（水溶性基质）金黄色葡萄球菌的检验—用1%吐温-80稀释液制备供试液＋膜法过滤＋滤膜置含5%吐温-80的硫乙醇酸盐增菌液中→（+）；②生白安片（含盐酸小檗胺）大肠杆菌检验—低速离心＋薄膜过滤法→（+）。E9x红软基地

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